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凝膠成像系統(tǒng)操作步驟
凝膠成像系統(tǒng)的操作步驟通常包括開機準備、樣品放置、軟件設(shè)置、圖像采集與后期處理幾個環(huán)節(jié),以下是詳細介紹:
開機準備:接通總電源開關(guān),通常位于凝膠成像系統(tǒng)右側(cè),待電源指示燈亮起后,按下燈箱后面的開關(guān),同時打開電腦,并啟動成像軟件。
樣品放置:
小心將凝膠放入凝膠成像儀的樣品倉,確保凝膠位置放正。對于需要透射成像的樣品,如DNA膠,應(yīng)放置在紫外臺正中間;對于蛋白質(zhì)膠等需反射成像的樣品,則放在拆疊白光板中間。
關(guān)閉暗箱抽屜或倉門,防止外界光線干擾。
軟件設(shè)置:
在軟件界面中,根據(jù)實驗需求選擇相應(yīng)的應(yīng)用程序,如“Ethidium Bromide”等。
選擇合適的拍攝模式和濾光片。例如,進行ECL拍攝時,將拍攝模式切換為“ECL模式”,并將濾光輪轉(zhuǎn)到ECL位;進行普通拍攝時,將濾光輪轉(zhuǎn)到UV位(無綠光鏡輪的無需調(diào)整)。
選擇合適的拍攝分辨率,并根據(jù)需要設(shè)置曝光時間、光圈大小等參數(shù)。部分儀器具有自動曝光功能,可點擊“自動曝光”按鈕,讓系統(tǒng)自動調(diào)整曝光參數(shù)。
圖像采集:
調(diào)整鏡頭的焦距,使樣品占據(jù)窗口約80%左右,并調(diào)整聚焦,使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰。
點擊軟件界面上的“拍攝”按鈕,進行圖像采集。采集過程中,注意觀察圖像質(zhì)量,如有需要,可對參數(shù)進行微調(diào)后重新采集。
后期處理:
圖像采集完成后,點擊軟件界面上的“File”選項,選擇“save image”項,將所拍圖片保存到指定目錄。
利用軟件提供的圖像分析工具,對采集到的圖像進行進一步處理和分析,如條帶識別、強度測定、數(shù)據(jù)比對等。